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　　標記原料的發(fā)展

　　隨著(zhù)材料學(xué)的發(fā)展，各種標記物相繼出現，目前，常見(jiàn)的標記物有膠體金、彩色微球、熒光微球、時(shí)間分辨熒光微球、磁性微球及量子點(diǎn)，實(shí)現了免疫層析定性至定量檢測的轉變，并進(jìn)一步提高了免疫層析試紙的靈敏度、特異性。接下來(lái)，為大家做一下盤(pán)點(diǎn)!

　　01　　膠體金標記

　　優(yōu)點(diǎn)：幾乎可以標記所有的蛋白分子，使用方便，成本低;檢測結果直觀(guān)，肉眼可觀(guān)察，不需要特殊的儀器設備。

　　缺點(diǎn)：膠體金產(chǎn)品批間差異較大，靈敏度低;采用物理吸附的方法結合，抗原/抗體容易從金顆粒表面脫離，標記物不穩定;只能給出定性或者半定量結果。

　　02　　彩色微球標記

　　優(yōu)點(diǎn)：色彩鮮艷而豐富，彩虹系列色彩均可調整，可實(shí)現多重檢測;粒度均一、單分散性好、檢測結果可重復性強;檢測結果直觀(guān)，肉眼可觀(guān)察，使用方便;與免疫層析用膠體金相比，靈敏度更高。

　　缺點(diǎn)：只能給出定性或者半定量結果。

　　03　　熒光微球標記

　　優(yōu)點(diǎn)：熒光微球具有相對穩定的形態(tài)結構，粒度均一、單分散性好、偶聯(lián)效率高、發(fā)光效率高;可進(jìn)行定量檢測且檢測結果重復性好;有較好的生物相容性且基本不受外界環(huán)境變化的影響。

　　缺點(diǎn)：熒光微球的價(jià)格略高于彩色微球的價(jià)格。

　　04　　時(shí)間分辨熒光微球標記

　　時(shí)間分辨熒光微球內部包埋稀土-鑭系元素(如Eu3+、Tb3+、Sm3+、Dy3+)，鑭系元素螯合物在紫外光源的激發(fā)下能發(fā)射特殊的熒光。時(shí)間分辨熒光免疫層析技術(shù)(TRFIA)是以微球作為標記物，標記抗原、抗體等物質(zhì)，利用時(shí)間分辨熒光分析儀，確定待測抗原、抗體的量。

　　TRFIA與化學(xué)發(fā)光、電化學(xué)發(fā)光免疫檢測技術(shù)并稱(chēng)為三大超靈敏檢測技術(shù)，在食品檢測、醫學(xué)臨床檢測、生物學(xué)科研檢測以及環(huán)境檢測等方面有較為廣泛的應用。

　　優(yōu)點(diǎn)：與普通熒光相比，具有Stocks位移大，熒光壽命長(cháng)等特點(diǎn)，可以有效避免樣品中的本底熒光，以及激發(fā)光等雜散光的影響，因此相比普通熒光具有更高的靈敏度和抗干擾能力。

　　缺點(diǎn)：儀器設備要求和成本相對較高。

　　05　　磁性微球標記

　　優(yōu)點(diǎn)：傳統的試紙檢測時(shí)，最多只能檢測膜表面10um以?xún)鹊男盘?，而膜的厚度通常有幾百微米，因?0%以上的標記物難以被有效檢測到。而利用磁場(chǎng)測定儀則可以測定到層析膜上包括膜表面和不能被光學(xué)儀器有效檢測到的膜深層的順磁顆粒信號，靈敏度得到提高。待測物和免疫層析試紙條中除磁性微球外的材料基本上不含有磁性物質(zhì)，本底干擾和其它干擾非常小，有利于提高檢測的正確性和可重復性。

　　缺點(diǎn)：利用磁性微球標記建立的快速檢測技術(shù)需要用外界磁場(chǎng)，較為麻煩。

　　06　　量子點(diǎn)標記

　　優(yōu)點(diǎn)：熒光強度高，抗漂白能力強;發(fā)光顏色多樣;可以減弱甚至消除背景熒光的干擾，量子點(diǎn)波普范圍寬，單一波長(cháng)激發(fā)光、一個(gè)波段的光譜或整個(gè)激發(fā)光源均可激發(fā)量子點(diǎn)，使其在整個(gè)可見(jiàn)區域產(chǎn)生一個(gè)波普比較窄的熒光。

　　缺點(diǎn)：量子點(diǎn)和某些蛋白質(zhì)結合后可能導致量子點(diǎn)的熒光減弱或淬滅，并且檢測時(shí)需要用紫外光作為激發(fā)光，操作程序稍顯復雜，儀器設備要求和成本都較高。

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